Диагностика отомикоза. Определенияе вида плесневых грибов

04 Мая в 15:55 1834 0


Все полученные у больных отомикозом штаммы грибов определяются до вида. Для определения вида плесневых грибов производили пересевы культур грибов на среду Чапека следующего состава:
Вода - 1000 мл
NaNO - 3 г
КH2Р04 (или К2НРО4) - 1 г
MgS04 - 0,5 г
KCI - 0,5 г
FeS04 - 0,01 г
Сахароза - 30 г


Каждый штамм гриба высевают в отдельную чашку Петри со средой Чапека и содержат в термостате при температуре 28—30 С. Первое изучение посевов проводят через 3—4 дня, а на 8—10-й день окончательно определяют полученные культуры.

Вначале изучают характер роста грибов: размеры колоний, их форма, цвет как с верхней, так и с нижней стороны чашек Петри, окраска субстрата, ширина и строение растущего края (погруженный, паутинный, плотный). Все эти наблюдения проводят невооруженным глазом или через луну, не открывая чашек Петри. Таким образом, на основании результатов последовательного ряда наблюдений составляют характеристику макроскопического строения колонии (рис 15, 16).

Рост культуры Penicillium notatum при посеве на среду Чапека.
Рис. 15. Рост культуры Penicillium notatum при посеве на среду Чапека.

Рост культуры Aspergillus fumigatus при посеве на среду Чапека.
Рис. 16. Рост культуры Aspergillus fumigatus при посеве на среду Чапека.

Через 8—10 дней, в период обильного спорообразования, проводят их микроскопическое изучение с целью окончательного определения вида данного штамма гриба. Такое определение основано почти исключительно на морфологических признаках и цвете колоний в отличие от видового определения бактерий, которые характеризуются и по степени их биохимической активности.



Микроскопическое исследование проводят как при средних увеличениях (Х200-300), так и при более сильных (Х400). При средних увеличениях изучают общее строение кисточек или конидиальных головок, расположение самих спор, конидиеносцев, строение мицелия, образование склероциев. При более сильном увеличении определяют отдельные детали конидиеносцев, их цвет, ветвление, размеры и форму конидий, а также другие более мелкие детали гриба. Такую идентификацию проводят для определения видов возбудителей отомикозов из родов Aspergillus, Penicillium, Mucor (рис. 17).

Микроскопическая картина культуры гриба рода Aspergillus на 10-и день роста на среде Чапека Видны конидиальная головка и осыпавшиеся конидин  х900.
Рис. 17. Микроскопическая картина культуры гриба рода Aspergillus на 10-и день роста на среде Чапека Видны конидиальная головка и осыпавшиеся конидин  х900.

Культуральная диагностика микозов, обусловленных дрожжеподобными грибами рода Candida, представляет известные трудности, потому что культуры дрожжеподобных грибов вырастают часто в ассоциации с различной бактериальной флорой, а для идентификации этих грибов необходимо получение чистых культур. В то же время для определения вида необходимо не только морфологическое, но и биохимическое изучение полученных культур.

В связи с этим первичные культуры дрожжеподобных грибов, полученные на среде Сабуро, подвергают механической очистке от посторонней флоры методом многократного разведения суспензии гриба в стерильной воде и посевом одной петли последнего разведения в виде штриха на среду Сабуро в чашку Петри. Выросшие затем колонии проверяют на чистоту (в окрашенном препарате) и в случае необходимости подвергают повторной очистке тем же методом. Существует и химический способ очистки: культуру гриба заливают па 1 ч 10% раствором серной кислоты.

В.Я. Кунельская
Похожие статьи
показать еще
 
Оториноларингология