Лабораторные методы исследования почки. Методы определения простатоспецифического антигена

02 Февраля в 17:40 1131 0


В настоящее время широкое распространение получил иммуноферментный метод определения простатоспецифического антигена (PSA). Для этого применяются наборы различных зарубежных фирм Abbott laboratories, Hybritech, Dianon systems и многие другие. Во всех методиках используются моноклональные антитела к простатоспецифическому антигену.

Образовавшийся комплекс PSA-антитело атакуется иммуноконъюгатом фермента и поликлональных антител к PSA, в результате чего создается «сэндвич», энзимная составляющая которого реагирует с субстратом, дающим окраску или начинающим флюоресцировать. Степень окраски или флюоресценции оценивается соответствующим детектирующим устройством, в которое вмонтирован спектрофотометр или флуориметр.

Детектирующие устройства различных фирм отличаются прежде всего по степени автоматизации процесса определения. Рассмотрим методику определения PSA на примере иммуноферментного флюоресцентного анализа на приборе IМХ фирмы Abbott. Прибор — это полностью автоматизированная cистема. В методике используются моноклональные антитела, «пришитые» к микрочастицам.



Сыворотку больных разливают по кюветам и автоматически переносят в реакционную камеру, где она реагирует с моноклональными антителами, затем к образовавшемуся комплексу добавляют поликлональные антитела из сыворотки козы против PSA, конъюгированные с щелочной фосфатазой. В результате реакции образуется «сэндвич». Образовавшийся комплекс атакует 4-метилумбеллилферол, который разлагается до метилумбеллилферола, обладающего способностью флюоресцировать.

Прибор регистриpyeт скорость реакции, строит калибровочную кривую по набору стандартов и автоматически вычисляет концентрацию PSA в пробе. Методика позволяет определять содержание вещества до 0,01 нг/мл и может использоваться для определения дельты PSA. Точность методов различных фирм идентична, поэтому они широко применяются в практическом здравоохранении.

Н.А. Лопаткин
Похожие статьи
показать еще
 
Урология